Preview

Acta Biomedica Scientifica

Расширенный поиск

Получение гипериммунных псевдотуберкулезных сывороток

https://doi.org/10.29413/ABS.2021-6.3.9

Полный текст:

Аннотация

 Aктуальность. Псевдотуберкулез остается серьезной проблемой здравоохранения, что диктует необходимость  разработки простых и экспрессных методов диагностики  этого заболевания. Эффективность последних во многом  зависит от активности и специфичности диагностических  сывороток. В настоящее время у нас в стране выпускается сыворотка диагностическая к Yersinia pseudotuberculosis
О-моновалентная (серотип I, III) с регламентированной областью применения: для ориентировочной реакции агглютинации на стекле (ФБУН НИИЭМ им. Пастера, г. Санкт-Петербург). Получение псевдотуберкулезных сывороток для более широкой сферы их использования, в частности, в качестве источника специфических антител при конструировании диагностических иммунобиологических  препаратов и тест-систем на псевдотуберкулез, является  актуальным и востребованным в практике здравоохранения.

Цель исследования: получение гипериммунных псевдотуберкулезных сывороток, перспективных для  использования в практике лабораторных исследований на псевдотуберкулез.

Материалы и методы. Животными-продуцентами псевдотуберкулезных сывороток служили кролики породы  шиншилла в возрасте 3–6 мес., весом 2,5–3,0 кг. В качестве иммуногенов использовали корпускулярный антиген (КАг) –  инактивированную кипячением суспензию клеток  эпидемически значимого штамма Yersinia pseudotuberculosis 3704 O:1b, выделенного при вспышке псевдотуберкулеза в г.  Зима Иркутской области, и препарат наружных мембран, содержащий липополисахарид, как основной  поверхностный иммуноген данного штамма. Для адсорбции  экспериментальных сывороток, с целью минимизации неспецифического реагирования, использовали  гетерологичные микроорганизмы Escherichiacoli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri и Y. enterocoliti ca О:3,  имеющие сходство поверхностных антигенных структур с возбудителем псевдотуберкулеза. Наличие специфических  антител в экспериментальных псевдотуберкулезных  сыворотках определяли в развернутой реакции  агглютинации (РА).

Результаты. Подобраны оптимальные схемы иммунизации кроликов, позволившие получить гипериммунные сыворотки против антигенов Y. pseudotuberculosis 3704
O:1b с активностью в развернутой реакции агглютинации  1:3200–1:6400. В невысоких разведениях экспериментальных сывороток (1:100–1:400), полученных против  корпускулярного антигена и антигенов наружных мембран,  в РА наблюдалось перекрестное реагирование с  гетерологичными штаммами (Escherichiacoli, Salmonella 
typhimurium, Shigellaflexneri, Y. enterocoliti ca О:3, S . enteritidis Gartnery). После адсорбции экспериментальных псевдотуберкулезных сывороток клетками гетерологичных  штаммов перекрестное реагирование с указанными  микроорганизмами в реакции агглютинации отсутствовало.

Заключение. Полученные гипериммунные адсорбированные сыворотки против инактивированного  кипячением корпускулярного антигена Y. pseudotuberculosis  3704 O:1b и антигенов наружных  мембран, могут быть использованы в качестве источника  специфических антител при конструировании  диагностических иммунобиологических препаратов для  выявления псевдотуберкулезного микроба, а также при  мониторировании эпидситуации по заболеванию.  

Об авторах

Т. Ю. Загоскина
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 доктор медицинских наук, старший научный сотрудник, заведующая отделом подготовки и усовершенствования специалистов

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



Е. Ю. Марков
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 доктор биологических наук, старший научный сотрудник, заведующий биохимическим отделом

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



Н. М. Андреевская
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 кандидат биологических наук, старший научный сотрудник научно-производственного отдела

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



В. Т. Климов
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела эпидемиологии

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



В. Б. Николаев
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник биохимического отдела

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



А. В. Крюкова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 младший научный сотрудник биохимического отдела

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



С. В. Игумнова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 врач эпидемиолог отдела эпидемиологии

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



Т. М. Долгова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



О. В. Гаврилова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 кандидат биологических наук, научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



В. Ю. Колесникова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 младший научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



М. В. Чеснокова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 доктор медицинских наук, профессор, заведующая отделом научного и учебно-методического обеспечения

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



Ю. О. Попова
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 лаборант биохимического отдела

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



С. В. Балахонов
ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Россия

 доктор медицинских наук, профессор, директор

 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия 



Список литературы

1. Сомова Л. М., Андрюков Б. Г., Плехова Н. Г. Проблема иерсиниозов в современном мире. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2015; 12 (4): 661–667.

2. Сомова Л. М., Андрюков Б. Г. К 60-летию открытия и изучения дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019; (6): 85–89. doi: 10.36233/0372-9311-2019-6-85-89

3. Кокорина Г. И. Генотипы штаммов Yersinia pseudotuberculosis и их клиническое и диагностическое значение: Автореф. дис. канд. мед. наук. СПб., 2012. 22 с.

4. Хаджу А., Иващенко С. В., Козлов С. В., Щербаков А. А., Волков А. А., Староверов С. А. Сравнительный анализ антительной активности экспериментальной и коммерческих диагностических кишечноиерсиниозных сывороток // Аграрный научный журнал. 2015; 4: 45–48.

5. Иващенко С. В., Маниесон В. Э. Получение антител к диметилсульфоксид-антигену Yersinia pseudotuberculosis // Новости науки в АПК. 2018; 2–1 (11): 340–342. doi: 10.25930/b6qq8005

6. Симакова Д. И. Конструирование видоспецифического антигенного полимерного препарата для серологической диагностики псевдотуберкулеза: Автореф. дис. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 2019; 22 с.

7. Крюкова А. В., Марков Е. Ю., Николаев В. Б., Попова Ю. О., Климов В. Т., Игумнова С. В. и др. Использование бактерицидного действия мочевины для выделения поверхностных структур Yersinia pseudotuberculosis O:1b и их физико-химические и антигенные свойства. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2019; (37): 92–94.

8. Тюменцев С. Н., Андреевская Н. М., Тюменцева И. С., Калиновский А. И., Репина Л. П., Загоскина Т. Ю. Способ получения диагностических сывороток. Патент на изобретение 2010577 С15 А 61 К 39/40. Иркутский н.-и. противочум. ин-т Сибири и ДВ. Заявка № 5023123/13, 09.07.1991; Опубл. 15.04.94. Бюл. № 7. 4 с.

9. Михайлов Л. М., Андреевская Н. М., Михайлова В. А., Баранникова Н. Л., Токарева Л. Е., Ястремская К. Ю., Балахонов С. В. Получение гипериммунных сывороток к термоэкстрактам из бруцелл в Sи L- формах // Проблемы особо опасных инфекций. 2016;

10. : 98–101. doi: 10.21055/0370-1069-2016-4-98-101

11. Михайлов Л. М., Баранникова Н. Л., Токарева Л. Е., Андреевская Н. М., Михайлова В. А., Кузнецов В. И., Ястремская К. Ю., Балахонов С. В. Получение моноспецифической бруцеллезной anti-abortus сыворотки на основе термоэкстракта из бруцелл в S-форме. Проблемы особо опасных инфекций. 2017; 2: 78–80. doi: 10.21055/0370-1069-2017-2-78-80

12. Гефан Н. Г., Андреевская Н. М., Климов В. Т., Каретникова Э. С. Моноспецифические О-сыворотки для диагностики Yersinia enterocolitica. Медицинская иммунология. 1999; 3–4: 57.

13. Перетрухина А. Т., Блинова Е. И. Бактерийные и вирусные препараты. М.: Академия Естествознания, 2011; 311 с.

14. Смирнов В. В., Чаплинский В. Я., Андреева З. Н., Богоявленская Л. Б. Научные основы производства диагностических препаратов. Киев: Наукова Думка, 1980. С. 77, 94.

15. Никитин В. М. Справочник методов иммунологии. – Кишенев: Штиинца, 1982. – С. 8–15.

16. Kenyon JJ, Reeves PR. The Wzy O-antigen polymerase of Yersinia pseudotuberculosis O:2a has a dependence on the Wzz chain-length determinant for

17. efficient polymerization. FEMS Microbiol Lett. 2013; 349 (2): 163–170. doi: 10.1111/1574-6968.12311

18. Kenyon JJ, Cunneen MM, Reeves PR. Genetics and evolution of Yersinia pseudotuberculosis O-specific polysaccharides: a novel pattern of O-antigen diversity. FEMS Microbiol Rev. 2017; 41 (2): 200–217. doi: 10.1093/femsre/fux002

19. Смирнов И. В. Возбудитель иерсиниоза и близкие к нему микроорганизмы. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2004; 6 (1): 10–21.

20. Chart H, Cheasty T. The serodiagnosis of human infections with Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis. FEMS Immunol Med Microbiol. 2006; 47 (3): 391–397. doi: 10.1111/j.1574-695X.2006.00100.x

21. Ogasawara M, Kobayashi S, Arai S, Laheji K, Hill JL, Kono DH, Yu DT. A heat-modifiable outer membrane protein carries an antigen specific for the species Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis. J Immunol. 1985; 135 (2): 1430–1436

22. Whittington RJ, Saunders VF, Egerton JR. Antigenic cross-reactions between the causative agent of ovine footrot, Dichelobacter nodosus, and other bacteria. Small Ruminant Research. 1996; 22 (1): 55–67. doi: 10.1016/0921–4488 (96) 00862-0

23. Jain R, Tuteja U, Batra HV. Characterization and utilization of monoclonal antibodies reactive to Yersinia pseudotuberculosis. Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health. 2003; 34 (4): 839–844.


Для цитирования:


Загоскина Т.Ю., Марков Е.Ю., Андреевская Н.М., Климов В.Т., Николаев В.Б., Крюкова А.В., Игумнова С.В., Долгова Т.М., Гаврилова О.В., Колесникова В.Ю., Чеснокова М.В., Попова Ю.О., Балахонов С.В. Получение гипериммунных псевдотуберкулезных сывороток. Acta Biomedica Scientifica. 2021;6(3):86-94. https://doi.org/10.29413/ABS.2021-6.3.9

For citation:


Zagoskina T.Yu., Markov E.Yu., Аndreevskaya N.M., Klimov V.T., Nikolaev V.B., Ulanskaya A.V., Kryukova A.V., Igumnova S.V., Dolgova T.M., Kolesnikova V.Yu., Chesnokova M.V., Gavrilova O.V., Balakhonov S.V. The production of hyperimmune pseudotuberculosis sera. Acta Biomedica Scientifica. 2021;6(3):86-94. (In Russ.) https://doi.org/10.29413/ABS.2021-6.3.9

Просмотров: 314


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2541-9420 (Print)
ISSN 2587-9596 (Online)