ДИНАМИКА РАЗМНОЖЕНИЯ ШТАММОВ ОРТОХАНТАВИРУСА HANTAAN НА МОДЕЛИ МЫШИНЫХ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ

Ортохантавирусы (род Orthohantavirus, семейство Hantaviridae) – возбудители широко распространённой в Российской Федерации природно-очаговой инфекции, геморрагической  лихорадки с почечным синдромом (ГЛПC). Важную роль в персистенции ортохантавирусa у  резервуарных хозяев среди прочих иммунологических реакций, а также в распространении  вируса в организме зараженного человека играют инфицированные макрофаги, которые, наряду с эндотелием сосудов, являются основными мишенями для ортохантавирусов.

Цель настоящей работы состояла в изучении особенности репликации штаммов ортохантавируса Hantaan, выделенных от мышей рода Аpodemus и влияния разной  множественности заражения на динамику размножения ортохантавирусов на культуре клеток.

Материалы и методы. В работе использовали 4 штамма ортохантавируса Hantaan, выделенных от A. agrarius (n = 2) и A. peninsulae (n = 2), отловленных в разных районах  Приморского края. В качестве модели использовали первичную культуру перитонеальных  мышиных макрофагов, которую заражали с различной множественностью заражения (от 10  до 0,1). Оценку инфицированности проводили с помощью непрямого метода  флюоресцирующих антител, выражая результаты, как долю антиген-содержащих клеток  среди всех клеток в поле зрения.

Результаты. Общая динамика ортохантавирусной инфекции на этой модели характеризовалась цикличностью, проявляющейся в увеличении доли антигенпозитивных  клеток через 2, 4, 6 и 8 часов после инфицирования. Размножение штаммов, выделенных от  A. agrarius, было более интенсивным по сравнению со штаммами, изолированными от A.  peninsulae, через 4 часа после заражения при одинаковой множественности заражения доля антигенпозитивных клеток была статистически значимо выше: 24,9 ± 2,38 % vs 15,2 ± 1,87  % (t = 3,20; p = 0,001414). Кроме того, при уменьшении множественности заражения  закономерно снижалась интенсивность репликации.

Заключение. Полученные результаты демонстрируют выраженную фенотипическую неоднородность штаммов ортохантавируса, изолированных от A. agrarius и A. peninsulae,  проявляющуюся различной динамикой репликации на культуре мышиных перитонеальных макрофагов.

1. Адамс Р. Методы культуры клеток для биохимиков. - М.: Мир, 1983. - 264 с. Adams R. (1983). Methods of cell culture for biochemists [Metody kul’tury kletok dlya biokhimikov]. Moskva, 264 p.

2. Ляпун И.Н., Плехова Н.Г., Компанец Г.Г., Смирнов И.С., Сомова Л.М. Морфофункциональная характеристика нейтрофилов, заражённых хантавирусом // Бюл. СО РАМН. - 2013. - Т. 33, № 2. - С. 26-32. Lyapun IN, Plekhova NG, Kompanets GG, Smirnov IS, Somova LM. (2013). Morphofunctional characteristics of neutrophils infected with hantavirus [Morfofunktsional’naya kharakteristika neytrofilov, zarazhennykh khantavirusom]. Byul. SO RAMN, 33 (2), 26-33.

3. Компанец Г.Г., Иунихина О.В., Потт А.Б. Антигенные характеристики штаммов ортохантавирусов, выделенных от мышей семейства Аpodemus // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2017. - № 12 (1). - С. 108- 111. Kompanets GG, Iunihina OV, Pott AB. (2017). Antigenic characteristics of strains of orthochantaviruses isolated from mice of the Apodemus family [Antigennye kharakteristiki shtammov ortokhantavirusov, vydelennykh ot myshey semeystva Apodemus]. Mezhdunarodnyy zhurnal prikladnykh i fundamental’nykh issledovaniy, 12 (1), 108-111.

4. Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Слонова Р.А., Компанец Г.Г., Лукьянова В.В., Якубович Н.В. Метаболическая активность макрофагов, заражённых hantaviruses - возбудителями геморрагической лихорадки с почечным синдромом // Биохимия. - 2005. - Т. 70, № 9. - С. 1198-1208. Plekhova NG, Somova LM, Slonova RA, Kompanets GG, Luk’yanova VV, Yakubovich NV. (2005). Metabolic activity of macrophages infected with hantaviruses - pathogens of hemorrhagic fever with renal syndrome [Metabolicheskaya aktivnost’ makrofagov, zarazhennykh hantaviruses - vozbuditelyami gemorragicheskoy likhoradki s pochechnym sindromom]. Biokhimiya, 70 (9), 1198-1208.

5. Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Компанец Г.Г., Слонова Р.А. Роль клеток моноцитарного происхождения в патогенезе хантавирусных инфекций // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2008. - № 2. - С. 32-36. Plekhova NG, Somova LM, Kompanets GG, Slonova RA. (2008). The role of cells of monocytic origin in the pathogenesis of hantavirus infections [Rol’ kletok monotsitarnogo proiskhozhdeniya v patogeneze khantavirusnykh infektsiy]. Tikhookeanskiy meditsinskiy zhurnal, (2), 32-36.

6. Потт А.Б., Компанец Г.Г. Изучение вирулентности штаммов геноварианта Amur и ортохантавируса Hantaan // Здоровье. Медицинская экология. Наука. - 2017. - № 5 (72). - С. 82-86. https://doi.org/10.5281/zenodo.1115481 Pott AB, Kompanets GG. (2017). The study of the virulence of strains of the Amur genovariant and Hantaan orthohantavirus [Izuchenie virulentnosti shtammov genovarianta Amur i ortokhantavirusa Hantaan]. Zdorov’e. Meditsinskaya ekologiya. Nauka, 5 (72), 82-86. https://doi.org/10.5281/zenodo.1115481

7. Ткаченко Е.А., Бернштейн А.Д., Дзагурова Т.К., Морозов В.Г., Слонова Р.А., Иванов Л.И., Транквилевский Д.В., Крюгер Д. Актуальные проблемы геморрагической лихорадки с почечным синдромом // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2013. - № 1. - С. 51-58. Tkachenko EA, Bernshtejn AD, Dzagurova TK, Morozov VG, Slonova RA, Ivanov LI, Trankvilevskij DV, Kryuger D. (2013). Actual problems of hemorrhagic fever with renal syndrome [Aktual’nye problemy gemorragicheskoy likhoradki s pochechnym sindromom]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii, (1), 51- 58.

8. Adams MJ, Lefkowitz EJ, King AMQ, Harrach B, Harrison RL, Knowles NJ, Kropinski AM, Krupovic M, Kuhn JH, Mushegian AR, Nibert M, Sabanadzovic S, Sanfaçon H, Siddell SG. (2017). Changes to taxonomy and the International Code of Virus Classification and Nomenclature ratified by the International Committee on Taxonomy of Viruses. Arch Virol, 162 (8), 2505-2538. https://doi.org/10.1007/s00705-017-3358-5

9. Easterbrook JD, Klein SL. (2008). Immunological mechanisms mediating hantavirus persistence in rodent reservoirs. PLoS Pathog, 4 (11), 1-5. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1000172

10. Geimonen E, Neff S, Raymond T, Kocer SS, Gavrilovskaya IN, Mackow ER. (2002). Pathogenic and nonpathogenic hantaviruses differentially regulate endothelial cell responses. Proc Natl Acad Sci USA, 99, 13837-13842. https://doi.org/10.1073/pnas.192298899

11. Lee PW, Gibbs CJ, Gajdusek DC, Yanagihara R. (1985). Serotypic classification of hantaviruses by indirect immunofluorescent antibody and plaque reduction neutralization tests. J Clin Microbiol, 22 (6), 940-944.

12. Nagai T, Tanishita O, Takahashi Y, Yamanouchi T, Domae K. (1985). Isolation of hemorrhagic fever with renal syndrome virus from leukocytes of rats and virus- replication in cultures of rat and human macrophages. J Gen Virol, (66), 1271-1278. https://doi.org/10.1099/0022- 1317-66-6-1271

13. Shin S, Yanagihara R, Song J-W. (2012). Distinct innate immune responses in human macrophages and endothelial cells infected with shrew-borne hantaviruses. Virology, 434 (1), 43-49. https://doi.org/10 0.1016/j.virol.2012.08.004

14. Yashina LN, Patrushev NA, Mishin VP, Kuzina II, Safronov PF, Chizhikov VE, Netesov SV, Ivanov LI, Zdanovskaya NI, Slonova RA, Kompanez GG, Schmaljohn C. (2000). Genetic diversity of hantaviruses associated with hemorrhagic fever with renal syndrome in the Far East of Russia. Virus Research, 70 (1-2), 31-44.