Морфологические предпосылки локального гемостатического эффекта экзогенного фибрин-мономера при его системном введении после травмы при подавлении агрегационной функции тромбоцитов в эксперименте

Обоснование. В опубликованных нами ранее исследованиях была продемонстрирована высокая гемостатическая активность низкой дозы экзогенного фибрин-мономера (ФМ) при его системном введении на модели дозированной травмы печени при предварительном угнетении агрегационной функции тромбоцитов. Однако анализ участия тромбоцитов в механизмах локального фибринообразования не анализировался.

Цель исследования. Провести сравнительный анализ клеточного состава венозной и раневой крови, а также крови в прираневых сосудах для оценки вклада тромбоцитов в обеспечение гемостатического эффекта экзогенно введённого ФМ при дозированной травме печени в условиях фармакологически обусловленной тромбоцитопатии.

Методы. На модели дозированной травмы печени у кроликов после угнетения агрегационной функции тромбоцитов ацетилсалициловой кислотой в сочетании с клопидогрелом оценивали влияние введения ФМ в сравнении с применением транексамовой кислоты (ТК). Изучали количество тромбоцитов в мазках венозной и раневой крови, а также в содержимом прираневых сосудов.

Результаты. Установлено, что при системном введении экзогенного ФМ количество тромбоцитов в мазках, полученных из раневой крови, снижается на 17,2 % в сравнении со свободно циркулирующей венозной кровью. Тромбоциты в раневой крови образуют агрегаты и находятся в активированном состоянии. В прираневых сосудах количество этих клеток было максимальным (150 в поле зрения) по сравнению с числом этих клеток в группах плацебо и с применением ТК (55 и 84 в поле зрения соответственно). Также в раневой крови встречались эритроциты с изменёнными формами – эхиноциты, шизоциты, стоматоциты и овалоциты.

Заключение. Системное введение экзогенного ФМ влияет на перераспределение тромбоцитов между системным кровотоком, прираневыми сосудами и раневой кровью, определяя его гемостатический эффект и локальное прираневое фибринообразование при дозированной травме печени. Предполагается наличие рецепторно-опосредованного привлечения тромбоцитов за счёт ФМ в прираневых сосудах с участием повреждённых эритроцитов.

1. Panteleev MA, Dashkevich NM, Ataullakhanov FI. Hemostasis and thrombosis beyond biochemistry: Roles of geometry, flow and diffusion. Thromb Res. 2015; 136(4): 699-711. doi: 10.1016/j.thromres.2015.07.025

2. Hoffman M, Monroe DM. Coagulation 2006: A modern view of hemostasis. Hematol Oncol Clin North Am. 2007; 21(1): 1-11. doi: 10.1016/j.hoc.2006.11.004

3. Ho KM, Pavey W. Applying the cell-based coagulation model in the management of critical bleeding. Anaesth Intensive Care. 2017; 45(2): 166-176. doi: 10.1177/0310057X1704500206

4. Wang J, Changxin Yu, Zhuang J, Wenxin Qi, Jiawen J, Xuanting L, et al. The role of phosphatidylserine on the membrane in immunity and blood coagulation. Biomark Res. 2022; 10(1): 4. doi: 10.1186/s40364-021-00346-0

5. Момот А.П., Вдовин В.М., Шахматов И.И., Толстокоров И.Г. Орехов Д.А, Шевченко В.О., и др. Системные гемостатические и протромботические эффекты фибрин-мономера в эксперименте при дозированной травме печени. Сибирский научный медицинский журнал. 2019; 39(1): 6-12. doi: 10.15372/SSMJ20190101

6. Вдовин В.М., Момот А.П., Орехов Д.А., Толстокоров И.Г., Шевченко В.О., Красюкова В.О., и др. Время-зависимые системные гемостатические эффекты фибрина-мономера при дозированной травме печени в эксперименте. Казанский медицинский журнал. 2019; 100(2): 257-263. doi: 10.17816/KMJ2019-257

7. Момот А.П., Вдовин В.М., Орехов Д.А., Лычёва Н.А., Толстокоров И.Г., Шевченко В.О., и др. Профилактика массивных интраоперационных кровотечений, ассоциированных с гепарином, при системном применении фибрин-мономера в эксперименте. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2019; 63(4): 48-55. doi: 10.25557/0031-2991.2019.04.48-55

8. Вдовин В.М., Бобров И.П., Шахматов И.И., Момот А.П. Морфологические последствия системного применения фибрин-мономера в условиях подавления гемостатического и усиления фибринолитического потенциалов при дозированной травме печени в эксперименте. Бюллетень медицинской науки. 2021; 21(1): 74-87.

9. Вдовин В.М., Момот А.П., Красюкова В.О., Толстокоров И.Г., Орехов Д.А., Шевченко В.О., и др. Системные гемостатические и гемостазиологические эффекты фибрин-мономера при прямом ингибировании тромбина в эксперименте. Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2019; 105(2): 207-215. doi: 10.1134/S0869813919020109

10. Вдовин В.М., Момот А.П., Орехов Д.А., Толстокоров И.Г., Лычёва Н.А., Шевченко В.О., и др. Системные гемостатические эффекты фибрин-мономера при ингибировании агрегационной функции тромбоцитов в эксперименте. Бюллетень сибирской медицины. 2020; 19(1): 36-42. doi: 10.20538/1682-0363-2020-1-36-42

11. Вдовин В.М., Момот А.П., Шахматов И.И., Бобров И.П., Орехов Д.А., Теряев В.В., и др. Эффекты транексамовой кислоты и экзогенного фибрин-мономера в области травмы и в системном кровотоке при фармакологическом подавлении функции тромбоцитов в эксперименте. Казанский медицинский журнал. 2021; 102(5): 642-653. doi: 10.17816/KMJ2021-642

12. Зиганшин А.У. Новые антиагреганты – блокаторы тромбоцитарных Р2-рецепторов. Казанский медицинский журнал. 2010; 91(1): 73-79.

13. Миронов А.Н. (ред.). Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. М.: Гриф и К; 2012.

14. Остроумова О.Д., Кравченко Е.В., Кочетков А.И. Лекарственно-индуцированная тромбоцитопения. Клиническая фармакология и терапия. 2019; 28(4): 56-64. doi: 10.32756/0869-5490-2019-4-56-64

15. Holinstat M. Normal platelet function. Cancer Metastasis Rev. 2017; 36(2): 195-198. doi: 10.1007/s10555-017-9677-x

16. Чучалин А.Г., Хохлов А.Л. (ред.). Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система). Выпуск XVIII. М.: Видокс; 2017.

17. Jia S, Hongwen J, Facheng R, Gang W, Meiying X, Yuliang X, et al. Protective effects of tranexamic acid on clopidogrel before coronary artery bypass grafting: A multicenter randomized trial. JAMA Surg. 2013; 148(6): 538-547. doi: 10.1001/jamasurg.2013.1560

18. Tengborn L, Blombäck M, Berntorp E. Tranexamic acid – an old drug still going strong and making a revival. Thromb. Res. 2015; 135(2): 231-242. doi: 10.1016/j.thromres.2014.11.012

19. Larrieu MJ. Action of fibrinogen degradation products and fibrin monomer soluble complexes on platelet aggregation. Scand J Haematol Suppl. 1971; 13: 273-279.

20. Пасторова В.Е., Ляпина Л.А., Кудряшов Б.А., Луговской Э.В. Агрегация тромбоцитов, вызываемая фибринмономером, и влияние комплексных соединений гепарина с адреналином или плазмином на этот процесс. Гематология и трансфузиология. 1990; 7: 5-7.

21. Момот А.П., Суханова Г.А. Агрегация тромбоцитов, индуцированная фибрин-мономером, и ее нарушения при внутрисосудистом свертывании крови. Гематология и трансфузиология. 1991; 11: 25-26.

22. Васильева Т.М., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Момот А.П., Баркаган З.С. Агрегация тромбоцитов человека in vitro при одновременном воздействии фибрин-мономера и некоторых проагрегантов. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002; 2: 23-26.

23. Левин Г.Я., Егорихина М.Н., Тараненко И.А., Момот А.П. Влияние фибрин-мономера на спонтанную агрегацию тромбоцитов. Клиническая лабораторная диагностика. 2011; 3: 39-42.

24. Levin GY, Egorihina MN. Aggregation of erythrocytes in burn disease. Int J Burns Trauma. 2011; 1(1): 34-41.

25. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. Казань: Фэн; 2000.

26. Pierschbacher MD, Ruoslahti E. Cell attachment activity of fibronectin can be duplicated by small synthetic fragments of the molecule. Nature. 1984; 309(5963): 30-33. doi: 10.1038/309030a0

27. Farrell DH, Thiagarajan P, Chung DW, Davie EW. Role of fibrinogen alpha and gamma chain sites in platelet aggregation. Proc Natl Acad Sci USA. 1992; 89(22): 10729-10732. doi: 10.1073/pnas.89.22.10729

28. Weisel JW, Nagaswami C, Vilaire G, Bennett JS. Examination of the platelet membrane glycoprotein IIb–IIIa complex and its interaction with fibrinogen and other ligands by electron microscopy. J Biol Chem. 1992; 267(23): 16637-16643.

29. Зубаиров Д.М., Зубаирова Л.Д. Микровезикулы в крови. Функции и их роль в тромбообразовании. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009.

30. Зубаиров Д.М., Щербатенко-Лушникова Л.А., Андрушко И.А., Габитов С.З., Литвинов Р.И., Кальбина А.В., и др. Диагностика тромбопластинемии при инфаркте миокарда. Терапевтический архив. 1981; 53(8): 29-30.

31. Колесник Е.А., Дерхо М.А. Артефакты форменных элементов и плазмы крови птиц, их происхождение и диагностическое значение. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2021; 248(4): 129-135. doi: 10.31588/2413-4201-1883-248-4-129-135