Оценка иммунного ответа SARS-СoV-2-специфичных Т-клеток методом ELISPOT

Пандемия COVID-19 стимулировала интерес к развитию биотехнологий, а также к поиску новых решений в сфере диагностики иммунных процессов. Для оценки вирус-специфичных иммунных реакций большая роль отводилась ответу иммуноглобулинов классов A, M, G. Позднее появилось понимание, что для комплексной оценки процессов адаптивного иммунитета целесообразно исследование его клеточной составляющей. Одним из наиболее доступных методов оценки Т-клеточного иммунитета, зарекомендовавшим себя в диагностике других инфекционных заболеваний, например, латентной туберкулёзной инфекции, является IGRA ELISPOT.
Цель работ. Определение SARS-СoV-2-специфичного иммунного ответа Т-лимфоцитов in vitro в периферической крови добровольцев различных групп методом IGRA ELISPOT. Мы оценили возможность применения метода для оценки Т-клеточного иммунного ответа на инфекцию и вакцинацию. Кроме того, мы определяли продолжительность периода сохранения активности SARS-СoV-2-специфичного иммунного ответа Т-лимфоцитов, индуцированного вакцинацией.
Материалы и методы. Исследования проводили на образцах венозной крови добровольцев трёх групп: 1) госпитализированные в стационар с диагнозом COVID-19; 2) перенёсшие COVID-19; 3) вакцинированные против COVID-19. Т-клеточный иммунный ответ оценивали с помощью тест-системы «ТиграТест® SARS-CoV-2», принцип работы которой заключается в определении in vitro количества Т-клеток, секретирующих гамма-интерферон в ответ на стимуляцию пептидами SARS-СoV-2 в двух панелях антигенов: 1) пептиды спайк-белка (S); 2) пептиды N-, M-,Orf3a-, Orf7a-белков.
Заключение. Метод IGRA ELISPOT является специфичным и чувствительным инструментом в оценке Т-клеточного иммунитета к вирусу SARS-CoV-2. Он позволяет оценить SARS-CoV-2-специфичные Т-клеточные реакции, индуцированные как естественной встречей с возбудителем, так и вакцинацией. Метод целесообразно использовать в рутинной практике для комплексной оценки иммунитета к SARS-CoV-2.

1. Bonilla FA, Oettgen HC. Adaptive Immunity. J Allergy Clin Immunol. 2010; 125(Suppl 2): S33–S40. doi: 10.1016/j.jaci.2009.09.017

2. Kanellopoulos JM, Ojcius DM. Development of humoral immunity. Biomed J. 2019; 42(4): 207-208. doi: 10.1016/j.bj.2019.08.003

3. Moss P. The T cell immune response against SARS-CoV-2. Nat Immunol. 2022; 23: 186-193. doi: 10.1038/s41590-021-01122-w

4. Grifoni A, Sidney J, Vita R, Peters B, Crotty S, Weiskopf D, et al. SARS-CoV-2 human T cell epitopes: Adaptive immune response against COVID-19. Cell Host Microbe. 2021; 29(7): 1076-1092. doi: 10.1016/j.chom.2021.05.010

5. Kudlay D, Kofiadi I, Khaitov M. Peculiarities of the T-cell immune response in COVID-19. Vaccines (Basel). 2022; 10(2): 242. doi: 10.3390/vaccines10020242

6. Козлов В.А., Тихонова Е.П., Савченко А.А., Кудрявцев И.В., Андронова Н.В., Анисимова Е.Н., и др. Клиническая иммунология. Практическое пособие для инфекционистов. Красноярск: Поликор; 2021.

7. Wyllie D, Jones HE, Mulchandani R, Trickey A, Taylor-Phillips S, Brooks T, et al. SARS-CoV-2 responsive T cell numbers and anti-Spike IgG levels are both associated with protection from COVID-19: A prospective cohort study in keyworkers. medRxiv. 2020; 20222778. doi: 10.1101/2020.11.02.20222778

8. Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin J-B, Olsson A, et al. Robust T cell immunity in convalescent individuals with asymptomatic or mild COVID-19. Cell. 2020; 183: 158-168.e14. doi: 10.1016/j.cell.2020.08.017

9. Shomuradova AS, Vagida MS, Sheetikov SA, Zornikova KV, Kiryukhin D, Titov A, et al. SARS-CoV-2 epitopes are recognized by a public and diverse repertoire of human T-cell receptors. Immunity. 2020; 53(6): 1245-1257.e5. doi: 10.1016/j.immuni.2020.11.004

10. Потеряев Д.А., Аббасова С.Г., Игнатьева П.Е., Стрижакова О.М., Колесник С.В., Хамитов Р.А. Оценка Т-клеточного иммунитета к SARS-CoV-2 у переболевших и вакцинированных против COVID-19 лиц с помощью ELISPOT набора ТиграТест® SARS-CoV-2. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2021; 21(3): 178-192. doi: 10.30895/2221-996X-2021-21-3-178-192

11. Kudlay D, Svistunov A, Satyshev O. COVID-19 vaccines: An updated overview of different platforms. Bioengineering. 2022; 9: 714. doi: 10.3390/bioengineering9110714

12. Инструкция по применению медицинского изделия для диагностики in vitro «ТиграТест® SARS-CoV-2». Тест на высвобождение интерферона гамма in vitro для определения в крови Т-лимфоцитов, специфически отвечающих на антигены вируса SARS-CоV-2 по ТУ 21.20.23-001-89761464-2020.