Preview

Acta Biomedica Scientifica

Расширенный поиск

Активированные нейтрофилы, продуцирующие HOCL, выявляющиеся при проточной цитометрии и конфокальной микроскопии с помощью целе-стинового синего В

https://doi.org/10.12737/article_590823a4895537.04307905

Полный текст:

Аннотация

HOCl образуется при стимуляции нейтрофилов благодаря активности миелопероксидазы. Для селективной спектрофотометрической детекции HOCl предложен целестиновый синий B (CB). Целью данной работы явилась разработка флуоресцентных методов оценки продукции HOCl нейтрофилами. Продукт реакции CB с HOCl флуоресцировал при 578 нм (возбуждение 487 нм). Методом конфокальной микроскопии получили изображения активированных нейтрофилов, окрашенных CB. При проточной цитометрии флуоресценция активированных 50 нМ PMA нейтрофилов была в 5 раз выше (p < 0,05), чем у клеток без активатора.

Об авторах

С. О. Козлов
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»
Россия


И. В. Кудрявцев
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»; ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова»
Россия


Н. А. Грудинина
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»
Россия


В. А. Костевич
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»; ФГБУ ФНКЦ физико-химической медицины ФМБА России
Россия


О. М. Панасенко
ФГБУ ФНКЦ физико-химической медицины ФМБА России
Россия


А. В. Соколов
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»; ФГБУ ФНКЦ физико-химической медицины ФМБА России; Санкт-Петербургский государственный университет
Россия


В. Б. Васильев
ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины»; Санкт-Петербургский государственный университет
Россия


Список литературы

1. Панасенко О.М., Горудко И.В., Соколов А.В. Хлорноватистая кислота как предшественник свободных радикалов в живых системах // Успехи биологической химии. - 2013. - Т. 53. - С. 195-244

2. Соколов А.В., Голенкина Е.А., Костевич В.А., Васильев В.Б., Судьина Г.Ф. Взаимодействие церулоплазмина и 5-липоксигеназы // Биохимия. - 2010. - Т. 75, № 12. -С. 1687-1694

3. Dypbukt JM, Bishop C, Brooks WM, Thong B, Eriksson H, Kettle AJ (2005) A sensitive and selective assay for chloramine production by myeloperoxidase. Free Radical Biology and Medicine, (39), 1468-1477.

4. Flemmig J, Zschaler J, Remmler J, Arnhold J (2012). The fluorescein-derived dye aminophenyl fluorescein is a suitable tool to detect hypobromous acid (HOBr)-producing activity in eosinophils. Journal of Biological Chemistry, (287), 27913-27923.

5. Franck T, Minguet G, Delporte C, Derochette S, Zouaoui Boudjeltia K, van Antwerpen P, Gach O, Deby-Dupont G, Mouithys-Mickalad A, Serteyn D (2015). An immunological method to combine the measurement of active and total myeloperoxidase on the same biological fluid, and its application in finding inhibitors which interact directly with the enzyme. Free Radical Research, (49), 790-799.

6. Huang J, Milton A, Arnold RD, Huang H, Smith F, Panizzi JR, Panizzi P (2016). Methods for measuring myeloperoxidase activity toward assessing inhibitor efficacy in living systems. Journal of Leukocyte Biology, (99), 541-548.

7. Malle E, Furtmüller PG, Sattler W, Obinger C (2007). Myeloperoxidase: a target for new drug development? British Journal of Pharmacology, (152), 838-854.

8. Sokolov AV, Kostevich VA, Kozlov SO, Donskyi IS, Vlasova II, Rudenko AO, Zakharova ET, Vasilyev VB, Panasenko OM (2015). Kinetic method for assaying the halogenating activity of myeloperoxidase based on reaction of celestine blue B with taurine halogenamines. Free Radical Research, (46), 777-789.

9. Weiss SJ, Klein R, Slivka A, Wei M (1982). Chlorination of taurine by human neutrophils. Evidence for hypochlorous acid generation. Journal of Clinical Investigation, (70), 598-607.

10. Urban CF, Ermert D, Schmid M, Abu-Abed U, Goosmann C, Nacken W, Brinkmann V, Jungblut PR, Zychlinsky A (2009). Neutrophil extracellular traps contain calprotectin, a cytosolic protein complex involved in host defense against Candida albicans. PLoS Pathogens, (5), e1000639.


Для цитирования:


Козлов С.О., Кудрявцев И.В., Грудинина Н.А., Костевич В.А., Панасенко О.М., Соколов А.В., Васильев В.Б. Активированные нейтрофилы, продуцирующие HOCL, выявляющиеся при проточной цитометрии и конфокальной микроскопии с помощью целе-стинового синего В. Acta Biomedica Scientifica. 2016;1(3(2)):86-91. https://doi.org/10.12737/article_590823a4895537.04307905

For citation:


Kozlov S.O., Kudryavtsev I.V., Grudinina N.A., Kostevich V.A., Panasenko O.M., Sokolov A.V., Vasilyev V.B. Activated producing HOCL neutrophils revealed by flow cytometry and confocal microscopy with celestine blue B. Acta Biomedica Scientifica. 2016;1(3(2)):86-91. (In Russ.) https://doi.org/10.12737/article_590823a4895537.04307905

Просмотров: 87


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2541-9420 (Print)
ISSN 2587-9596 (Online)