Выявление мембраносвязанных протеаз Francisella tularensis

Проведено исследование наличия протеолитической активности и состав протеаз в поверхностных структурах клеток шести штаммов Francisella tularensis разных подвидов. Препараты мембранной фракции возбудителя туляремии получали путем обработки микробной массы мочевиной. Субстратный электрофорез выявил три общих для всех штаммов полипептида, обладающих протеолитической активностью. У препаратов F. tularensis subsp. nearctica и F. tularensis subsp. novicida обнаружены дополнительные полосы протеаз.

субклеточные фракции, наружные мембраны, ферменты, протеазы протеолитическая активность

1. Олсуфьев Н.Г. Таксономия, микробиология и лабораторная диагностика возбудителя туляремии. -М.: Медицина, 1975. - 192 с

2. Павлович Н.В., Шиманюк Н.И., Мишанькин Б.Н. Нейраминидазная активность представителей рода Francisella // Журн. микробиол. - 1992. - № 9-10. -С. 8-10

3. Родионова И.В. Дифференциация географических рас Francisella tularensis на основании активности цитруллинуреидазы // Лабор. дело. - 1970. - № 1. - С. 42-43

4. Шеенков Н.В., Опочинский Э.Ф., Валышев А.В. и др. Факторы персистенции Francisella tularensis // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2006. - № 1. - С. 63-68

5. Bina X.R., Wang C., Miller M.A. et al. (2006). The Bla2 ß-lactamase from the live-vaccine strain of Francisella tularensis encodes a functional protein that is only active against penicillin-class ß-lactam antibiotics. Arch. Microbiol., 186 (3), 219-228.

6. Chandler J.C., Sutherland M.D., Harton M.R., Molins C.R., Anderson R.V., Heaslip D.G. et al. (2015). Francisella tularensis LVS surface and membrane proteins as targets of effective post-exposure immunization for tularemia. J. Proteome Res., (14), 664-675.

7. Dresler J., Klimentova J., Stulik J. (2014). Francisella tularensis membrane complexome by bluenative/SDSPAGE. J. Proteomics, (75), 257-269.

8. Fortier A.H., Green S.J., Polsinelli T.R., Jones T., Crawford R.M., Leiby D.A., Elkins K.L., Meltzer M.S., Nacy C.A. (1994). Life and death of an intracellular pathogen: Francisella tularensis and the macrophage. Immunol. Ser., (60), 349-361.

9. Heussen C., Dowdle E.B. (1980) Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamide gels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem., 102 (1), 196-202

10. Huntley J.F., Conley P.G., Hagman K.E., Norgard M.V. (2007). Characterization of Francisella tularensis outer membrane proteins. J. Bacteriol., (189), 561-574.

11. Janovská S., Pávkova I., Hubálek M., Lenco J., Macela A., Stuli'k J. (2007). Identification of immunore-active antigens in membrane proteins enriched fraction from Francisella tularensis LVS. 1mmunol. Lett., (108), 151-159.

12. Laemmli U.K., Favre M. (1973). Maturation of the head of bacteriophage T4. I. DNA packaging events.J. Mol. Biol., 80 (4), 575-599.

13. Mohapatra N.P., Shilpa S., Rajaram M.V.S., Dang M.C., Reilly T.J., El Benna J., Schlesinger L.S., Gunn J.S. (2010). Francisella acid phosphatases inactivate NADPH oxidase complex components in human phagocytes by dephosphorylation. J. 1mmun., 184 (9), 5141-5150.

14. Nelson D.C., Garbe J., Collin M. (2011). Cysteine proteinase SpeB from Streptococcus pyogenes - a potent modifier of immunologically important host and bacterial proteins. Biochem., 392 (12), 1077-1088

15. Oyston P.C.F. (2008). Francisella tularensis: unravelling the secrets of an intracellular pathogen. J. Med. Microbiol., 57 (8), 921-930.

16. Potempa J., Pike R. (2009). Corruption of innate immunity by bacterial proteases. J. 1nnate 1mmun., 1 (2), 70-87.