НЕКОТОРЫЕ ПУТИ ОПТИМИЗАЦИИ ПРОЦЕССА ПРОИЗВОДСТВА ВАКЦИНЫ ЧУМНОЙ ЖИВОЙ И СПОСОБЫ ОЦЕНКИ ЕЕ ИММУНОГЕННОСТИ (ОБЗОР)

В обзоре представлены современные данные о научно-исследовательских разработках в области живых чумных вакцин, которые касаются получения антибиотикоустойчивых субкультур вакцинных штаммов, конструирования вакцинных штаммов продуцентов со сниженной реактогенностью, создание таблетированной формы препарата. Изложен материал по методическим приемам совершенствования производства чумной вакцины, в частности стабилизации числа живых микробных клеток в прививочной дозе коммерческой вакцины путем снижения температурного режима культивирования c 27 °С до 21 °С, снижения концентрации микробных клеток (м.к.) в ампуле c (5-10) × 1010 до (1-4) × 1010 в 1 мл, сокращения этапа лиофилизации c 28 до 18 ч, снижения количества человеко-доз в ампуле c 100-125 до 20-50, а также ускорения процесса получения концентрата микробных клеток (культивирование в аппарате ферментере, тангенциальная микрофильтрация) и подбора комбинированных (мясная и соевая питательная основа) питательных сред и условий их приготовления (сокращение времени ферментативного гидролиза с 14 до 3 суток). Проанализированы тенденции совершенствования аппаратурного звена технологического процесса, которые заключаются в использовании аппаратов-ферментеров вместо аппарата для культивирования микробов Шестеренко, одноразовых мешков Flexboy, позволяющих исключить применение стеклянных бутылей и операцию монтажа бутылей, а также применение роботизированных сублимационных установок для сушки жидкой формы вакцины сухой чумной, исключающих использование низкотемпературных холодильников. Для оценки качества конечного продукта производства живой чумной сухой вакцины, наряду с регламентированным методом оценки иммуногенности (расчет эффективной иммунизирующей дозы) и количественного учета феномена переживания белых мышей, предлагается оценка цитоэнзимохимических и морфометрических показателей, изменения которых характеризуют иммунологическую активность и состояние мобилизационной и бактерицидной способности системы фагоцитирующих клеток организма

возбудитель чумы, живая чумная вакцина, иммуногенность

1. Абзаева Н.В. Повышение жизнеспособности Yersinia pestis EV в биомассе вакцины: дис.. канд. биол. наук. - Ставрополь, 2010. - 122 с.

2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. -М.: Медицина, 1990. - 384 с.

3. Агеев С.А. Конструирование аттенуированных штаммов Yersinia pestis с пониженной реактогенностью: дис.. канд. биол. наук. - Оболенск, 2010. - 122 с.

4. Алутин И.М. Влияние температуры окружающей среды на биологическую активность возбудителя чумы: автореф.. канд. мед. наук. - Саратов, 1974. - 19 с.

5. Анисимов А.П. Факторы, обеспечивающие блокообразующую активность Yersinia pestis // Молекул. генетика. - 1999. - № 4. - С. 11-15.

6. Апарин Г.П., Вершинина Т.И. Методические рекомендации по определению степени иммуногенности авирулентных штаммов чумного микроба для белых мышей. - Иркутск, 1984. - 8 с.

7. Будыка Д.А. Научно-методические основы совершенствования живой чумной вакцины: дис.. докт. мед. наук. - Ставрополь, 2002. - 279 с.

8. Будыка Д.А., Абзаева Н.В., Руднев С.М. Бактерицидная активность полиморфноядерных лейкоцитов крови белых мышей привитых против чумы и в различных схемах инфицирования чумной инфекцией // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 2009. - № 2 (100). - С. 56-60.

9. Вакцины и вакцинация: национальное руководство / под. В.В. Зверева, Б.Ф. Семенова, Р.М. Хаитова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 880 с.

10. Витязева С.А., Старовойтова Т.П., Дубровина В.И., Голубинский Е.П. Методические рекомендации по использованию показателей клеточного состава иммунокомпетентных органов экспериментальных животных для оценки иммунной перестройки организма в процессе формирования иммунитета к чуме. - Иркутск, 2007. - 7 с.

11. Выбор тест-культуры для оценки качества питательных основ и сред, используемых в производстве вакцины чумной живой сухой / Е.В. Желудкова [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. - 2007. -№ 2 (94). - С. 72-74.

12. Ефременко А.А. Разработка биотехнологии вакцины чумной живой сухой со сниженным количеством человеко-доз в производственной упаковке (ампуле): дис.. канд. биол. наук. - Ставрополь, 2005. - 117 с.

13. Иванова Г.Ф., Будыка Д.А., Абзаева Н.В. Сравнительное изучение эффективности противочумных вакцин, полученных из биомасс, выращенных при (21 ± 1) °С // Фундаментальные исследования в биологии и медицине: сборник науч. трудов. - Ставрополь, 2007. - Вып. 2. - С. 186-188.

14. Индуцированная продукция IFN-y и IL-4 как показатель функциональной активности TH1- и та2-клеток у вакцинированных против чумы людей / Т.Н. Щуковская [и др.] // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. - 2011. - № 6. - С. 78-83.

15. Исследования по иммунизации против чумы. Сообщение 4. Опыт ревакцинации волонтеров «химической» и живой чумной вакцинами / С.М. Дальвадянц [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. - 2006. -№ 1 (91). - С. 57-61.

16. Исупов И.В., Бугоркова С.А., Кутырев В.В. Патоморфологические аспекты доклинических испытаний различных вакцин против чумы, сибирской язвы и холеры. - Саратов, 2004. - 180 с.

17. Кутырев В.В., Девдариани З.Л., Саяпина Л.В. Современное состояние научных исследований в области вакцинопрофилактики особо опасных бактериальных инфекций // Проблемы особо опасных инфекций. - 2006. - № 2 (92). - С. 18-24.

18. Математическое моделирование процесса приготовления таблетированной формы чумной живой вакцины / С.А. Швецов [и др.] // Биомедицина. - 2011. - № 1. - C. 64-71.

19. Медуницин Н.В. Вакцинология. - М.: «Триада-Х», 2010. - 512 с.

20. Медуницин Н.В., Покровский В.И. Основы иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекционных болезней. - М.: ГЕОТАР-Медиа, 2005. - 528 с.

21. Молдаван И.А. Экспериментальное обоснование преимуществ сочетанной специфической и экстренной профилактики чумы: дис.. канд. биол. наук. - Ростов-на-Дону, 2005. - 172 с.

22. Основные требования к вакцинным штаммам чумного микроба : метод. указания. - М.: Федеральный центр госанэпиднадзора Минздрава России, 2002. - 63 с.

23. Пат. 2260620 Российская Федерация, МПК7 C12N1/20, C12Q1/04. Питательная среда (жидкая) для культивирования чумного микроба вакцинного штамма ЕВ / Катунина Л.С., Старцева О.Л., Малецкая О.В., Головнева С.И., Смирнова Е.Б., Курилова А.А.; заявитель и патентообладатель Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт. - № 2004104518/13; заявл.16.02.2004. опубл. [20.09.2005]: URL: http://www1.fips_servl/ fips_servlet?lockId (дата обращения: 22.02.2013).

24. Пат. 2260620 Российская Федерация, МПК7 C12N7/02, C12N7/00, A61K39/12, A61K39/175, A61K39/187. Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин / Коваленко В.Н., Асяев А.А., Черкасов Н.А., Ежов А.В., Багин С.В., Хонин А.З., Мохов Д.А.; заявитель и патентообладатель Научно-исследовательский институт микробиологии МО РФ. - № 2001117972/13; заявл. 27.06.2001. опубл. [20.07.2003]: URL: http:// www1.fips_servl/fips_servlet?lockId (дата обращения: 22.02.2013).

25. Пигаревский Е.В. Лизосомально-катионный тест // Методические рекомендации. - М., 1979. -29 с.

26. Получение биомассы бацилл методом глубинного периодического культивирования / А.А. Степин [и др.] // Биотехнология. - 1994. - № 3. - С. 31-33.

27. Регламент производства № 1542-04 Вакцина чумная живая сухая. - Ставрополь, 2004. - 256 с.

28. Регламент производства № 37-86 Вакцина чумная живая сухая. - Министерство здравоохранения СССР. - 303 с.

29. Сапин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммунодефицит. - М.: АПП «Джангар», 2000. - 184 с.

30. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / под ред. М.О. Биргера. - 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1982. - 464 с.

31. Старцева О.Л. Совершенствование биотехнологии производства питательных сред для культивирования чумного микроба на основе сырья животного и растительного происхождения: дис.. канд. биол. наук. - Ставрополь, 2005. - 158 с.

32. Стратегия борьбы с инфекционными болезнями и санитарная охрана территорий в современных условиях / Г.Г. Онищенко [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. - 2006. - № 2 (92). - С. 5-9.

33. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Ярилин А.А. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы: руководство для врачей. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 352 с.

34. Anisimov A.P., Lindler L.E., Pier G.B. Intraspecific diversity of Yersinia pestis // Clinical Microbiology Reviews. - 2004. - Vol. 17, N 2. - P. 434-464.

35. Girard G. Immunity in plague. Acquisitions supplied by 30 years of work on the «pasteurella pestis ev» (girard and robic) strain // Biol. Med. (Paris). - 1963. -Vol. 52. - Р. 631-731.

36. http://www.sartorius (дата обращения: 19.03.2013).

37. John M. The NBT test - a review // Folia Haematol. Int. Mag. Klin. Morphol. Blutforsch. - 1980. -Vol. 107, N 3. - Р. 358-371.

38. Perry R.D., Fetherston J.D. Yersinia pestis -etiologic agent of plague // Clin. Microbiol. Rev. - 1997. - Vol. 10, N 1. - P. 35-66.