Оценка потенциальной цитотоксичности в рамках прижизненного наблюдения на Biostation CT

В последние десятилетия большую актуальность для медицинских и фармацевтических исследований приобретают методы, основанные на клеточных технологиях. В данной работе было рассмотрено применение BioStation CT для непрерывного прижизненного наблюдения за культурой клеток асцитной карциномы Эрлиха в условиях воздействия разными концентрациями двух активных веществ (от 1,25 до 20 мг/л). В результате мониторинга состояния клеток карциномы в течение 4,5 суток было показано, что вещество № 2 не оказывает влияние на жизнеспособность клеток, тогда как вещество № 1 вызывает их гибель. При этом воздействие данного активного вещества имеет дозозависимый характер. Фотодокументирование с интервалом в 2 часа позволило проследить различия в скорости разрушения клеток (интенсивная утрата целостности в первые сутки с дальнейшей стабилизацией числа живых клеток или постепенной дезинтеграцией клеток на протяжении всего эксперимента), а также различия во времени достижения 50 %-й гибели. Таким образом, в процессе исследования было продемонстрировано, что BioStation CT является перспективным оборудованием для токсикологических исследований и значительно расширяет возможности детектирования процессов, происходящих с живыми клетками, за достаточно протяжённый период времени. Благодаря тому, что данный прибор совмещает свойства CO₂-инкубатора и микроскопа, что полностью исключает контаминирующее стрессовое влияние изменений условий окружающей среды во время экспозиции с тестируемым веществом, а также предоставляет возможность проводить фотодокументирование клеточной культуры в фазовом контрасте или сфлуоресцентным окрашиванием вавтоматическом режиме, BioStation CT делает возможным непрерывное, не ограниченное по срокам наблюдение с последующим анализом особенностей поведения клеток на всем протяжении эксперимента, что принципиально отличается от систем, допускающих только фиксирование конечного результата долгосрочного воздействия активным веществом.

1. Das V, Bruzzese F, Konecny P, Iannnell F, Budillon A, Hajduch M. (2015). Pathophysiologically relevant in vitro tumor models for drug screening. Drug Discov Today, 20 (7), 848-855. doi: 10.1016/j.drudis.2015.04.004

2. Eisenbrand G, Pool-Zobel B, Baker V, Balls M, Blaauboer BJ, Boobis A, Carere A, Kevekordes S, Lhuguenot J-C, Pieters R, Kleiner J. (2002). Methods of in vitro toxicology. Food Chem Toxicol, (40), 193-236.

3. Ekwall B, Silano V, Paganuzzi-Stammati A, Zucco F. (1990). Toxicity tests with mammalian cell cultures. Shortterm Toxicity Tests for Non-genotoxic Effects, 75-98.

4. Eskes C, Boström A-C, Bowe G, Coecke S, Hartung T, Hendriks G, Pamies D, Piton A, Rovida C. (2017). Good cell culture practices & in vitro toxicology. Toxicol in Vitro, (45), 272-277. doi: 10.1016/j.tiv.2017.04.022

5. Jennings P. (2015). The future of in vitro toxicology. Toxicol in Vitro, 29 (6), 1217-1221. doi: 10.1016/j.tiv.2014.08.011

6. Krewski D, Acosta Jr D, Andersen M, Anderson H, Bailar III JC, Boekelheide K, Brent R, Charnley G, Cheung VG, Green Jr S, Kelsey KT, Kerkvliet NI, Li AA, McCray L, Meyer O, Patterson RD, Pennie W, Scala RA, Solomon GM, Stephens M, Yager J, Zeise L. (2010). Toxicity testing in the 21st century: a vision and a strategy. J Toxicol Environ Health B Crit Rev, (13), 51-138. doi: 10.1080/10937404.2010.483176

7. Roggen EL. (2011). In vitro toxicity testing in the twenty-first century. Front Pharmacol (2), 1-3. doi: 10.3389/fphar.2011.00003

8. Shurygina IA, Shurygin MG, Dmitrieva LA, Fadeeva TV, Ganenko TV, Tantsyrev AP, Sapozhnikov AN, Sukhov BG, Trofimov BA. (2015). Bacterioand lymphocytotoxicity of silver nanocomposite with sulfated arabinogalactan. Russian Chemical Bulletin, 64 (7), 16291632.