Загоскина Татьяна Юрьевна – доктор медицинских наук, старший научный сотрудник, заведующая отделом подготовки и усовершенствования специалистов,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Tatyana Yu. Zagoskina – Dr. Sc. (Med.), Senior Research Officer, Head of the Department of Professional and Advanced Training,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Марков Евгений Юрьевич – доктор биологических наук, старший научный сотрудник, заведующий биохимическим отделом,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Evgeny Yu. Markov – Dr. Sc. (Biol.), Head of the Department of Biochemistry,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Андреевская Нина Михайловна – кандидат биологических наук, старший научный сотрудник научно-производственного отдела,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Nina M. Аndreevskaya – Cand. Sc. (Biol.), Senior Research Officer at the Research and Production Department,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Климов Валерий Тимофеевич – кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела эпидемиологии,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Valery T. Klimov – Cand. Sc. (Med.), Senior Research Officer at the Department of Epidemiology,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Николаев Валерий Борисович – кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник биохимического отдела,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Valery B. Nikolaev – Cand. Sc. (Med.), Senior Research Officer at the Department of Biochemistry,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Долгова Татьяна Михайловна – научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Tatyana M. Dolgova – Research Officer at the Department of Professional and Advanced Training,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Колесникова Ольга Борисовна – кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Olga B. Kolesnikova – Cand. Sc. (Biol.), Senior Research Officer at the Department of Professional and Advanced Training,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Гаврилова Ольга Владимировна – кандидат биологических наук, научный сотрудник отдела подготовки и усовершенствования специалистов,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Olga V. Gavrilova – Cand. Sc. (Biol.), Research Officer at the Department of Professional and Advanced Training,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Крюкова Анна Витальевна – младший научный сотрудник биохимического отдела,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Anna V. Kryukova – Junior Research Officer at the Department of Biochemistry,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Попова Юлия Олеговна – лаборант биохимического отдела,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Yulia O. Popova – Laboratory Assistant at the Department of Biochemistry,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Старикова Ольга Андреевна – лаборант отдела подготовки и усовершенствования специалистов,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Olga A. Starikova – Laboratory Assistant at the Department of Professional and Advanced Training,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Дорощенко Антон Александрович – младший научный сотрудник биохимического отдела,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Anton A. Doroshchenko – Junior Research Officer at the Department of Biochemistry,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Чеснокова Маргарита Валентиновна – доктор медицинских наук, профессор, заведующая отделом научного и учебно-методического обеспечения,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Margarita V. Chesnokova – Dr. Sc. (Med.), Professor, Head of the Department of Scientific and Academic Support,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Балахонов Сергей Владимирович – доктор медицинских наук, профессор, директор,
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Sergey V. Balakhonov – Dr. Sc. (Med.), Professor, Director,
Trilissera str. 78, Irkutsk 664047
Актуальность. Псевдотуберкулёз остаётся серьёзной проблемой здравоохранения, что определяет целесообразность разработки экспрессных методов его ранней диагностики. Для обнаружения патогена нами сконструирована тест-система для дот-иммуноанализа (ДИА) на основе меченых наночастицами серебра (НЧС) антител, изолированных из гипериммунной кроличьей сыворотки, полученной против убитых клеток Yersinia pseudotuberculosis сероварианта О:1b.
Цель исследования. Оценка возможности использования дот-иммуноанализа для экспресс-идентификации культур Y. pseudotuberculosis, выделенных из клинического материала и объектов окружающей среды, на начальном этапе бактериологического исследования при проведении лабораторной диагностики заболевания.
Методы. В работе использованы материалы по вспышке псевдотуберкулёза в МКОУ «Крыловская школа-интернат» Бакчарского района Томской области в 2021 г. Специфические антитела из кроличьих гипериммунных сывороток, полученных против корпускулярного антигена Y. pseudotuberculosis 3704 серотипа О:1b, метили НЧС и использовали в ДИА на нитроцеллюлозных мембранах. О наличии в исследуемом материале возбудителя псевдотуберкулёза судили по формированию пятен серого цвета разной интенсивности (от 4+ до 1+).
Результаты. Все исследованные штаммы Y. pseudotuberculosis, выделенные бактериологическим методом из клинического материала от больных людей и объектов окружающей среды, обнаруживались в ДИА в концентрациях ≥ 3,1 × 104 микробных клеток в 1 мл (м.к./мл).
Заключение. Разработанная тест-система для ДИА с использованием НЧС в качестве маркера специфических антител для обнаружения Y. pseudotuberculosis в культурах, выделенных из смывов с овощей и клинического материала от больных, в том числе с микст-инфекцией, позволяет с высокой чувствительностью (≥ 3,1 × 104 м.к./мл) обнаруживать возбудитель псевдотуберкулёза, обеспечивая экспрессную идентификацию изолированных культур на начальном этапе бактериологического исследования.
Background. Pseudotuberculosis remains a serious healthcare problem, which determines the expediency of developing the express methods for its early diagnosis. To detect the pathogen, we designed test system for dot-immunoassay (DIA) based on antibodies labeled with silver nanoparticles (SNPs) isolated from hyperimmune rabbit serum obtained against killed cells of Yersinia pseudotuberculosis of O:1b serovariant.
The aim. To assess the possibility of using dot-immunoassay for express identification of Y. pseudotuberculosis cultures isolated from clinical material and environmental objects at the initial stage of bacteriological study during laboratory diagnosis of the disease.
Methods. We used the materials from the outbreak of pseudotuberculosis in the Krylovskaya Boarding School of the Bakcharsky district of the Tomsk region in 2021. Specific antibodies from hyperimmune rabbit sera obtained against Y. pseudotuberculosis 3704 particulate antigen of O:1b serotype were labeled with SNPs and used in DIA on nitrocellulose membranes with visualization of reaction results with a solution of a physical developer. The presence of the causative agent of pseudotuberculosis in the test material was inferred by the formation of gray spots of different intensity (from 4+ to 1+).
Results. All Y. pseudotuberculosis strains isolated using bacteriological method on the second day of the study from clinical material obtained from sick people and environmental objects were detected in DIA at concentrations ≥ 3.1 × 104 microbial cells per milliliter (m.c./ml).
Conclusion. The designed test system for dot-immunoassay using SNPs as a marker of specific antibodies for the detection of Y. pseudotuberculosis in cultures isolated from swabs from vegetables and clinical material from patients, including those with mixed infection, allows us to detect a specific corpuscular antigen with a high sensitivity (≥ 3.1 × 104 m.c./ml), providing express identification of isolated cultures at the initial stage of bacteriological study.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.