actabiomedicaActa Biomedica ScientificaActa Biomedica Scientifica2541-94202587-9596Scientific Centre for Family Health and Human Reproduction Problems10.12737/20616actabiomedica-171Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЕEXPERIMENTAL RESEARCHES IN BIOLOGY AND MEDICINEЗимографический анализ липолитических ферментов субклеточных фракций Vibrio cholerae О1 и О139 серогруппZymographic analysis of lipolytical enzymes of subcellular Vibrio cholerae fractions of O1 and O139 serogroupsКозловС. Н.KozlovS. N.ejimei@mail.ruНиколаевВ. Б.NikolaevV. B.noemail@neicon.ruМарковЕ. Ю.MarkovE. Y.noemail@neicon.ruУрбановичЛ. Я.UrbanovichL. Y.noemail@neicon.ruМиткееваС. К.MitkeevaS. K.noemail@neicon.ruФКУЗ «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора»Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East of Rospotrebnadzor201628042016125559Copyright © Козлов С.Н., Николаев В.Б., Марков Е.Ю., Урбанович Л.Я., Миткеева С.К., 20162016Козлов С.Н., Николаев В.Б., Марков Е.Ю., Урбанович Л.Я., Миткеева С.К.Kozlov S.N., Nikolaev V.B., Markov E.Y., Urbanovich L.Y., Mitkeeva S.K.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.actabiomedica.ru/jour/article/view/171

С помощью электрофореза и тестов радиальной энзимодиффузии с использованием различных поверхностноактивных неионных детергентов в качестве субстратов, импрегнированных в полиакриламидный и агарозный гель, изучены спектр и активность липолитических ферментов субклеточных фракций холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп. В составе и активности липолитических ферментов выявлены межштаммовые различия. Зимографические методы представляют собой удобный, наглядный и простой инструмент, пригодный для сравнительного изучения состава и свойств бактериальных гидролаз.

Zymographic analysis showed that all subcellular fractions of the serogroups possessed different degree of lipolytical activity. Maximal hydrolysis in the radial enzyme-diffusion reaction in agarose gel was observed in Tween-20, Tween-80, Triton Х-305 and Triton Х-405. Total hydrolase activity of urea extracts in Tween-20, Tween-80, Triton Х-405, Span-85 excelled those in the preparations of outer membranes. Maximal lipolytical activity in regard to the Tweens was shown by the preparations of urea extracts prepared from the nontoxigenic strains of O1 serogroups, while in relation to the Tritons - preparations of urea extracts from the toxigenic strains (p < 0,05).

зимографический анализсубклеточные фракциилиполитические ферментысубстратный электрофорезVibrio choleraezymographic analysissubcellular fractionlipolytical enzymeVibrio choleraesubstrate electrophoresisReferencesАдамов А.К. Перспективы совершенствования холерных вакцин // Эпидемиология, эпизоотология и профилактика особо опасных инфекций. - Саратов, 1986. - С. 75-84Адамов А.К. Перспективы совершенствования холерных вакцин // Эпидемиология, эпизоотология и профилактика особо опасных инфекций. - Саратов, 1986. - С. 75-84Дуванова О.В., Шиманюк Н.Я., Мишанькин Б.Н. Способность расщеплять твин 20 как дифференциальный тест для вибрионов O139 серовара различного происхождения // Клин. лаб. диагн. - 2000. - № 5. - С. 48-49Дуванова О.В., Шиманюк Н.Я., Мишанькин Б.Н. Способность расщеплять твин 20 как дифференциальный тест для вибрионов O139 серовара различного происхождения // Клин. лаб. диагн. - 2000. - № 5. - С. 48-49Кузьмиченко И.А., Грачёва И.В., Плотников О.П. Деструктивная активность и рост холерного вибриона в присутствии твинов // Пробл. особо опасных инф. - 2001. - Вып. 1, № 81. - С. 101-105Кузьмиченко И.А., Грачёва И.В., Плотников О.П. Деструктивная активность и рост холерного вибриона в присутствии твинов // Пробл. особо опасных инф. - 2001. - Вып. 1, № 81. - С. 101-105Паканещикова Н.В., Силищев Н.Н., Галимзяно-ва Н.Ф., Логинов О.Н. Сравнительное изучение зависимости липолитической активности бактерий рода Serratia от состава питательной среды // Башкирский химическй журнал. - 2006. - Т. 13, № 4. - С. 31-34Паканещикова Н.В., Силищев Н.Н., Галимзяно-ва Н.Ф., Логинов О.Н. Сравнительное изучение зависимости липолитической активности бактерий рода Serratia от состава питательной среды // Башкирский химическй журнал. - 2006. - Т. 13, № 4. - С. 31-34Способ дифференциации атоксигенных штаммов холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп от токсигенных по гидролазной активности: Пат. 2375457 Рос. Федерация; C1 C12Q 1/04, 1/30, C12R 1/63 / Агафонова В.В., Телесманич Н.Р., Акулова М.В.; Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт. - № 2008117194; заявл. 29.04.08; опубл. 10.12.09. Бюл. № 34, 8 cСпособ дифференциации атоксигенных штаммов холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп от токсигенных по гидролазной активности: Пат. 2375457 Рос. Федерация; C1 C12Q 1/04, 1/30, C12R 1/63 / Агафонова В.В., Телесманич Н.Р., Акулова М.В.; Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт. - № 2008117194; заявл. 29.04.08; опубл. 10.12.09. Бюл. № 34, 8 cСпособ определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий: Пат. 2501014 Рос. Федерация; С1 G01N 33/50, 33/48 / Козлов С.Н., Марков Е.Ю., Николаев В.Б., Урбанович Л.Я., Загоскина Т.Ю., Попова Ю.О.; Иркутский научно-исследовательский противочумный институт. - № 2012132418; заявл. 15.08.12.; опубл. 10.12.13. Бюл. № 34, 8 сСпособ определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий: Пат. 2501014 Рос. Федерация; С1 G01N 33/50, 33/48 / Козлов С.Н., Марков Е.Ю., Николаев В.Б., Урбанович Л.Я., Загоскина Т.Ю., Попова Ю.О.; Иркутский научно-исследовательский противочумный институт. - № 2012132418; заявл. 15.08.12.; опубл. 10.12.13. Бюл. № 34, 8 сТелесманич Н.Р. Триацилглицеролипазная активность гемолитических холерных вибрионов // Ж. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2004. -№ 2. - С. 11-14Телесманич Н.Р. Триацилглицеролипазная активность гемолитических холерных вибрионов // Ж. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2004. -№ 2. - С. 11-14Урбанович Л.Я., Марков Е.Ю., Голубинский Е.П., Колесник P.C., Саппо С.Г., Ганин B.C., Каретникова Э.С., Иванова Т.А. Характеристика иммунобиологических свойств антигенного препарата наружных мембран холерного вибриона // Биотехнология. - 1996. - № 6. -С. 27-33Урбанович Л.Я., Марков Е.Ю., Голубинский Е.П., Колесник P.C., Саппо С.Г., Ганин B.C., Каретникова Э.С., Иванова Т.А. Характеристика иммунобиологических свойств антигенного препарата наружных мембран холерного вибриона // Биотехнология. - 1996. - № 6. -С. 27-33Bornscheuer U.T. (2002). Microbial carboxyl esterases: classification, properties and application in biocatalysis. FEMS Microbiol. Rev., 26 (1), 73-81.Bornscheuer U.T. (2002). Microbial carboxyl esterases: classification, properties and application in biocatalysis. FEMS Microbiol. Rev., 26 (1), 73-81.Hosseingholi E.Z. (2014). In silico analysis of Acinetobacter baumanri phospholipase B as a subunit vaccine candidate. Acta Biotheoretica, 64 (4), 455-475.Hosseingholi E.Z. (2014). In silico analysis of Acinetobacter baumanri phospholipase B as a subunit vaccine candidate. Acta Biotheoretica, 64 (4), 455-475.Ingole K.V., Jalgaonkar S.V., Fule R.P. (1998). Study of proteases and other enzymes of Vibrio cholerae O1 Eltor and O139 serotypes isolated in Yavatmal (Maharashtra). Indian J. Pathol. Microbiol., 41 (4), 419-422.Ingole K.V., Jalgaonkar S.V., Fule R.P. (1998). Study of proteases and other enzymes of Vibrio cholerae O1 Eltor and O139 serotypes isolated in Yavatmal (Maharashtra). Indian J. Pathol. Microbiol., 41 (4), 419-422.Jensen R.G. (1983). Detection and determination of lipase (acylglycerol hydrolase) activity from various sources. Lipids, 18 (9), 650-657.Jensen R.G. (1983). Detection and determination of lipase (acylglycerol hydrolase) activity from various sources. Lipids, 18 (9), 650-657.Rosenstein R., Gotz F. (2000). Staphylococcal lipases: biochemical and molecular characterization. Biochimie, 82, 1005-1014.Rosenstein R., Gotz F. (2000). Staphylococcal lipases: biochemical and molecular characterization. Biochimie, 82, 1005-1014.Schuepp C., Kermasha S., Michalski M.C., Morin A. (1997). Production, partial purification and characterisation of lipases from Pseudomonas fragi CRDA 037. Proc. Biohem., 32 (3), 225-232.Schuepp C., Kermasha S., Michalski M.C., Morin A. (1997). Production, partial purification and characterisation of lipases from Pseudomonas fragi CRDA 037. Proc. Biohem., 32 (3), 225-232.Stehr F., Kretschmar M., Kroger C., Hube B., Schafer W. (2003). Microbial lipases as virulence factors. J. Mol. Cat. B: Enzym., 22 (5-6), 347-355.Stehr F., Kretschmar M., Kroger C., Hube B., Schafer W. (2003). Microbial lipases as virulence factors. J. Mol. Cat. B: Enzym., 22 (5-6), 347-355.Whayeb S.A., Yamamoto K., Castillo M.Y. (1996). Lysophospholipase L2 of Vibrio cholerae O1 affects cholera toxin production. FEMS Immun. Med. Microbiol., 15 (1), 9-15.Whayeb S.A., Yamamoto K., Castillo M.Y. (1996). Lysophospholipase L2 of Vibrio cholerae O1 affects cholera toxin production. FEMS Immun. Med. Microbiol., 15 (1), 9-15.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.